Обезвоживание, уплотнение и заливка материала в парафин

Оснащение: термостаты, бюксы/банки с притертой пробкой, фарфоровые стаканы, формочки для заливки, эксикатор, пинцет, водяная баня.

Реактивы: растворы спиртов различной концентрации (70%-100%), ксилол, парафин, смесь парафина и 5% воска.

Алгоритм: 

1 этап — обезвоживание:

- промытый материал поместить в 50% спирт на 1-3 часа

- перенести в 70% спирт на 3-6 часов

- перенести в 96% спирт 1 порция на 3-6 часов

-         перенести в 96% спирт 2 порция на 3-6 часов

-         поместить в 100% спирт на 3-6 часов

2 этап — уплотнение:

- материал поместить для пропитывания в ксилол (1-я порция) по 1-3 часа

- перенести во 2-ю порцию ксилола на 1-3 часа

- поместить материал в смесь ксилола с парафином в соотношении 1:1 в термостате при 37 градусах на 3-6 часов

- пропитать материал в парафине (1-я порция) в термостате при 56 градусах на 1,5-2 часа

- перенести материал во 2-ю порцию парафина в термостат при 56 градусах на 1,5-2 часа

3 этап — заливка в парафин (вариант 1):

- приготовить бумажные формочки

- емкость с парафином (2-я порция) перенести на водяную баню

- теплым пинцетом перенести материал в центр бумажной формочки

- заполнить формочку парафином для заливки

- формочки до краев погрузить в холодную воду, пока на поверхности не появится пленка

- формочку полностью погрузить в воду до полного отвердения парафина

3 этап — заливка в парафин (вариант 2):

Заливка материала с использованием модульной системы для заливки в парафин

Оснащение: модульная система для заливки  парафин, заливочные формы, пинцет

Реактивы: парафиновая среда для заливки

Алгоритм:

- выбрать заливочную форму в зависимости от размера кусочка

- налить расплавленный парафин в заливочную форму (если в лаборатории нет возможности использовать для заливки готовую гомогенизированную парафиновую среду (например, Histomix), которая уже содержит в своем составе парафин, натуральный воск и синтетические полимерные добавки, то к этой порции парафина следует добавить 5% воска)

- перенести материал из кассеты в заливочную форму

- накрыть заливочную форму крышкой от кассеты

- завершить заливку материала через отверстия кассеты

- поместить блок на поверхность охлаждающего модуля

- отделить кассету с блоком от заливочной формы

- образец готов к микротомии