Лабораторная работа. Ферменты. Изучение свойств ферментов. | |
Автор: drug | Категория: Прочее | Просмотров: | Комментирии: 0 | 14-07-2013 17:10 |
Лабораторная работа. Ферменты. Изучение свойств ферментов.
Исследуемый материал: слюна разведенная в 5 раз.
Оборудование: термостат, штатив с пробирками.
Опыт №1. Специфичность действия ферментов.
Принцип реакции. Каждый фермент действует только на одно вещество или на группу сходных субстратов, то есть специфичность основана на строгом соответствии структуры субстрата и активного центра фермента. Так амилаза действует только на крахмал, сахараза — только на сахарозу.
Реактивы: 1% раствор крахмала, 2% раствор сахарозы, 5% раствор сульфата меди, 10% раствор гидроксида натрия.
Ход работы: в штативе установить две пробирки и пронумеровать. Затем внести в первую пробирку 10 капель раствора крахмала, во вторую пробирку — 10 капель раствора сахарозы. После чего в каждую пробирку добавить по 4 капли слюны. Содержимое пробирок перемешать и поставить в термостат на 15 минут при температуре 37ºС. Затем содержимое пробирок разделить пополам и провести с одной половиной реакцию с йодом, а с другой половиной — реакцию Троммера. Результаты проведенных опытов занести в таблицу.
Номер пробирки |
Субстрат |
Фермент |
Реакции |
|
с йодом |
Троммера |
|||
1 |
Крахмал |
Амилаза |
|
|
2 |
Сахароза |
Амилаза |
|
|
Сделать вывод: т. е. укажите субстрат для фермента амилазы слюны.
Опыт №2. Влияние температуры на активность ферментов.
Принцип реакции. Ферменты чувствительны к температуре и проявляют свою активность при температуре 35-45ºС. При температуре 50ºС их активность снижается, а при 70-80ºС действие прекращается, что связано с нарушением структуры активного центра фермента и не происходит соединение фермента с субстратом.
Реактивы: 1% раствор крахмала, 1% раствор йода, 5% раствор сульфата меди, 10% раствор гидроксида натрия.
Ход работы: в две пробирки прилить по 10 капель раствора крахмала, а затем добавить по пять капель: в первую пробирку раствора слюны, во вторую — предварительно прокипяченной слюны. Содержимое пробирок перемешать и поставить в термостат на 15 минут при 37ºС. Затем содержимое пробирок разделить пополам и провести с одной половиной реакцию с йодом, а с другой половиной — реакцию Троммера. Результаты проведенных опытов занести в таблицу.
Номер пробирки |
Субстрат |
Фермент |
Реакции |
|
с йодом |
Троммера |
|||
1 |
Крахмал |
Р-р слюны |
|
|
2 |
Крахмал |
Р-р прокипяченной слюны |
|
|
Сделать вывод.
Опыт №3. Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов.
Принцип реакции: различные вещества могут повышать активность ферментов (активаторы) или тормозить его активность (ингибироты). Так для амилазы слюны активатором служат ионы хлора, для липазы поджелудочной железы — желчные кислоты, а в качестве ингибитора амилазы выступают ионы меди.
Реактивы: 1% раствор крахмала, 1% раствор йода, 1% раствор хлорида натрия, 1% раствор сульфата меди.
Ход работы: в штативе установить 3 пробирки и пронумеровать. Затем внести по 1 капле: в первую пробирку — раствор хлорида натрия, во вторую пробирку — раствор сульфата меди, в третью пробирку — дистиллированную воду. После этого во все пробирки внести по одной капле раствора йода. Наблюдайте за окраской растворов в пробирках. Результаты занести в таблицу.
Номер пробирки |
Субстрат |
Фермент |
Реакции |
||
вода |
сульфат меди |
хлорид натрия |
|||
1 |
Крахмал |
Амилаза |
|
|
|
2 |
Крахмал |
Амилаза |
|
|
|
3 |
Крахмал |
Амилаза |
|
|
|
Сделать вывод, указать активатор и ингибитор.